گھر > بلاگ > انڈسٹری نیوز

ELISA کٹ کے کام کیا ہیں؟

2022-12-23

ELISA کٹ اینٹیجن یا اینٹی باڈی کے ٹھوس مرحلے اور اینٹیجن یا اینٹی باڈی کے انزائم لیبلنگ پر مبنی ہے۔ ٹھوس کیریئر کی سطح پر جکڑا ہوا اینٹیجن یا اینٹی باڈی اب بھی اپنی مدافعتی سرگرمی کو برقرار رکھتا ہے، اور اینٹیجن یا اینٹی باڈی کا لیبل لگا ہوا انزائم اپنی امیونولوجیکل سرگرمی اور انزائم کی سرگرمی دونوں کو برقرار رکھتا ہے۔ تعین کے وقت، ٹیسٹ کے تحت نمونہ (جس میں اینٹی باڈی یا اینٹیجن ماپا جاتا ہے) ٹھوس کیریئر کی سطح پر اینٹیجن یا اینٹی باڈی کے ساتھ رد عمل ظاہر کرتا ہے۔ ٹھوس کیریئر پر بننے والے اینٹیجن اینٹی باڈی کمپلیکس کو دھونے کے ذریعے مائع میں موجود دیگر مادوں سے الگ کیا جاتا ہے۔

انزائم لیبل والے اینٹیجنز یا اینٹی باڈیز کو شامل کیا جاتا ہے، جو رد عمل کے ذریعے ٹھوس کیریئر سے بھی منسلک ہوتے ہیں۔ اس وقت، ٹھوس مرحلے میں انزائم کی مقدار نمونے میں موجود مادہ کی مقدار کے تناسب میں ہوتی ہے۔ انزائم ری ایکشن کے سبسٹریٹ کو شامل کرنے کے بعد، سبسٹریٹ کو انزائم کے ذریعے رنگین مصنوعات بننے کے لیے اتپریرک کیا جاتا ہے۔ مصنوع کی مقدار کا براہ راست تعلق نمونے میں جانچے گئے مادے کی مقدار سے ہے، اس لیے رنگ کی گہرائی کے مطابق معیار یا مقداری تجزیہ کیا جا سکتا ہے۔

انزائمز کی اعلیٰ اتپریرک کارکردگی بالواسطہ طور پر مدافعتی ردعمل کے نتائج کو بڑھا دیتی ہے، جس سے پرکھ انتہائی حساس ہو جاتی ہے۔ ELISA کا استعمال اینٹیجنز کا تعین کرنے کے لیے کیا جا سکتا ہے، لیکن اینٹی باڈیز کا تعین کرنے کے لیے بھی استعمال کیا جا سکتا ہے۔

ELISA کٹ کے بنیادی اصول
یہ شے کو انزائم سے جوڑنے کے لیے اینٹیجن اور اینٹی باڈی کے مخصوص ردعمل کا استعمال کرتا ہے، اور پھر مقداری تعین کے لیے انزائم اور سبسٹریٹ کے درمیان رنگ کا رد عمل پیدا کرتا ہے۔ پیمائش کا مقصد اینٹی باڈی یا اینٹیجن ہو سکتا ہے۔

تعین کے اس طریقہ کار میں تین ریجنٹس ضروری ہیں:
â  ٹھوس مرحلہ اینٹیجن یا اینٹی باڈی (مدافعتی جذب کرنے والا)
â¡ اینٹیجن یا اینٹی باڈی کا لیبل لگا انزائم (مارکر)
انزائم ایکشن کے لیے سبسٹریٹ (کلر ڈیولپمنٹ ایجنٹ)

پیمائش میں، اینٹیجن (اینٹی باڈی) پہلے ٹھوس کیریئر کا پابند ہوتا ہے، لیکن پھر بھی اپنی مدافعتی سرگرمی کو برقرار رکھتا ہے، اور پھر اینٹی باڈی (اینٹیجن) اور انزائم کا ایک کنجوگیٹ (مارکر) شامل کیا جاتا ہے، جو اب بھی اپنی اصل مدافعتی سرگرمی اور انزائم کو برقرار رکھتا ہے۔ سرگرمی جب کنجوگیٹ ٹھوس کیریئر پر اینٹیجن (اینٹی باڈی) کے ساتھ رد عمل ظاہر کرتا ہے تو انزائم کا متعلقہ ذیلی حصہ شامل کیا جاتا ہے۔ یعنی کیٹلیٹک ہائیڈولیسس یا REDOX ردعمل اور رنگ۔

رنگ کا سایہ جو یہ پیدا کرتا ہے وہ ماپا جانے والے اینٹیجن (اینٹی باڈی) کی مقدار کے متناسب ہے۔ اس رنگ کی مصنوعات کو ننگی آنکھ، آپٹیکل مائکروسکوپ، الیکٹران مائکروسکوپ سے دیکھا جا سکتا ہے، اسپیکٹرو فوٹومیٹر (انزائم لیبل آلہ) سے بھی ماپا جا سکتا ہے۔ طریقہ آسان، آسان، تیز اور مخصوص ہے۔

X
We use cookies to offer you a better browsing experience, analyze site traffic and personalize content. By using this site, you agree to our use of cookies. Privacy Policy
Reject Accept