بنیادی تعارف
Erythrocyte lysate خون کے سرخ خلیات کو ہٹانے کا سب سے آسان اور آسان طریقہ ہے، یعنی lysate کے ساتھ خون کے سرخ خلیوں کو تقسیم کرنا، جس سے نیوکلیٹیڈ خلیوں کو نقصان نہیں پہنچتا اور خون کے سرخ خلیوں کو مکمل طور پر ختم کر سکتا ہے۔ لائسیٹ کلیویج ایک ہلکے سرخ خون کے خلیات کو ہٹانے کا طریقہ ہے، جو بنیادی طور پر انزائم ہاضمہ کے ذریعے منتشر ٹشو سیلز کی علیحدگی اور تطہیر، لیمفوسائٹس کی علیحدگی اور تطہیر، اور ٹشو پروٹین اور نیوکلک کے تجربات میں خون کے سرخ خلیات کو ہٹانے کے لیے استعمال ہوتا ہے۔ تیزاب نکالنا. سرخ خون کے خلیات کے لیسیٹ کے ذریعہ حاصل کردہ ٹشو سیلز میں سرخ خون کے خلیات نہیں ہوتے ہیں، اور اسے مزید بنیادی ثقافت، سیل فیوژن، فلو سائٹومیٹری، نیوکلک ایسڈ اور پروٹین کی علیحدگی اور نکالنے وغیرہ کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔
ہدایات براے استعمال
ٹشو سیل کا نمونہ
1. تازہ ٹشوز کو لبلبہ/انزائم یا کولیجینیز کے ذریعے ہضم کیا گیا اور سنگل سیل سسپشن میں منتشر کیا گیا، اور سپرناٹینٹ کو سینٹرفیوگریشن کے ذریعے خارج کر دیا گیا۔
2. ریفریجریٹر سے ELS lysate 4â پر لیں، ELS lysate کو 1:3-5 کے تناسب سے سیل precipitate میں شامل کریں (3-5ml lysate کو 1ml کے سیل کمپیکٹڈ میں شامل کریں)، آہستہ سے پھونک ماریں اور مکس کریں۔
3. 800-1000rpm پر 5-8 منٹ کے لیے سینٹری فیوج کریں اور اوپری سرخ صاف مائع کو ضائع کر دیں۔
4. 2-3 بار کے لیے ہینک کے محلول یا سیرم سے پاک کلچر محلول کے ساتھ جمع کیا گیا اور سینٹرفیوج کیا گیا۔
5، اگر کریکنگ مکمل/مکمل نہیں ہے تو مرحلہ 2 اور 3 کو دہرایا جا سکتا ہے۔
6. بعد کے تجربات کے لیے دوبارہ معطلی کے خلیے؛ اگر RNA نکالا جاتا ہے، تو بہتر ہے کہ DEPC پانی کا استعمال کرتے ہوئے مرحلہ 4 سے تیار کردہ محلول میں ایسا کیا جائے۔
خون کے سرخ خلیات کی زندگی کا دور بہت مختصر ہوتا ہے، صرف 120 دن، لیکن یہ خون کو بہت تیزی سے دوبارہ پیدا کرتے ہیں، اور اس صورت میں یہ خلیے کی تقسیم کی خاص صلاحیت رکھتے ہیں، اور یہ سب سے تیزی سے تقسیم ہونے والے خلیے ہیں، اس لیے یہ خلیہ بہت قیمتی ہے، تو یہ سیل کلچر کے لیے بہت مفید ہے۔ یہ بہت آسان ہے، اس میں کوئی آرگنیلز نہیں ہوتے، صرف خلیے کی جھلی اور پروٹین ہوتے ہیں۔